biến điểm (làm mất hay xuất hiện một vị trí giới hạn mới) hoặc có hay không sự thay

đổi một trình tự DNA.

Trƣờng hợp trình tự DNA của hai cá thể cùng loài hoàn toàn giống nhau về số

lƣợng và kích thƣớc thì sẽ có sự giống nhau về các băng DNA. Ngƣợc lại, nếu có xuất

hiện đột biến điểm hoặc thay đổi một trình tự đoạn DNA trên sợi DNA thì sẽ có sự

khác nhau về các băng DNA.

Các bƣớc để tiến hành kỹ thuật RFLP:

Tiến hành phân lập DNA của sinh vật muốn kiểm tra sự đa hình của DNA

Xác định enzyme cắt phù hợp nhất với genome của sinh vật kiểm tra

Tiến hành phân cắt mẫu DNA thu đƣợc với enzyme cắt

Chạy điện di sản phẩm cắt trên gel agarose hoặc polyarylamid

Tiến hành lai Southern blot với mẫu dò thích hợp

Xác định kích thƣớc của các đoạn đa hình trên phim sau khi thực hiện

Southern blot và đƣa ra kết luận

Quá trình phân tích RFLP trên nhiễm sắc thể gặp rất nhiều khó khăn. Việc xử lý

enzyme giới hạn của DNA này sẽ tạo ra hàng triệu mảnh DNA có kích thƣớc rất khó

phân biệt. Nếu chạy điện di trên gel agarose và nhuộm bằng ethium bromide thì không

dễ gì phát hiện ra đƣợc sự khác biệt giữa chúng. Kết quả ta nhận đƣợc hình ảnh là một

dải liên tục gồm nhiều vệt đậm. Do đó việc thiết kế probe (mẫu dò) để xác định sự đa

hình trong kỹ thuật Southern blot là vô cùng quan trọng