Chƣơng 1. MỞ ĐẦU 1

1.1. Đặt vấn đề 1

1.2. Mục đích 2

1.3. Yêu cầu 2

Chƣơng 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Sơ lƣợc về cây cà chua 3

2.1.1. Nguồn gốc và phân bố 3

2.1.2. Phân loại học 4

2.1.3. Đặc điểm thực vật học 4

2.1.4. Giá trị dinh dƣỡng 5

2.2. Sơ lƣợc về bệnh hại cà chua 6

2.2.1. Đặc điểm chung bệnh do virus 6

2.2.2. Sự lan truyền bệnh virus thực vật 7

2.2.3. Sơ lƣợc về TSWV 8

2.2.3.1. Nguồn gốc TSWV 8

2.2.3.2. Cấu trúc TSWV 9

2.2.3.3. Phân loại TSWV 10

2.2.3.4. Dãy ký chủ của TSWV 11

2.2.3.5. Con đƣờng truyền bệnh 11

2.2.3.6. Hình thức tấn công và gây bệnh 12

2.2.3.7. Điều kiện phát triển 13

2.2.3.8. Triệu chứng bệnh 13

2.2.3.9. Khống chế bệnh do TSWV 14

2.3. Các phƣơng pháp chẩn đoán bệnh 16

2.3.1. Phƣơng pháp chẩn đoán dựa vào triệu chứng 16

2.3.2. Phƣơng pháp chẩn đoán bằng cây chỉ thị 17

2.3.3. Phƣơng pháp chẩn đoán bằng kính hiển vi điện tử 17

2.3.4. Phƣơng pháp ELISA 18

2.3.5. Phƣơng pháp RT – PCR 19

2.3.5.1. Nguyên tắc của phƣơng pháp PCR 19

2.3.5.2. Nested PCR 20

2.3.5.3. RT – PCR (Reverse Transcriptase – Polymerase Chain Reaction) . 20

2.4. Một số kết quả nghiên cứu về TSWV 23

2.4.1. Nghiên cứu nƣớc ngoài 23

2.4.2. Nghiên cứu trong nƣớc 23

Chƣơng 3. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24

3.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu 24

3.2. Vật liệu 24

3.2.1. Dụng cụ và thiết bị 24

3.2.1.1. Dụng cụ 24

3.2.1.2. Máy móc, thiết bị 25

3.2.2. Hoá chất 25

3.2.2.1. Hoá chất dùng trong kỹ thuật ELISA25

3.2.2.2. Hóa chất dùng trong kỹ thuật RT – PCR 26

3.3. Phƣơng pháp nghiên cứu 28

3.3.1. Nội dung nghiên cứu 28

3.3.2. Phƣơng pháp lấy mẫu 28

3.3.3. Phƣơng pháp phát hiện TSWV 30

3.3.3.1. Phƣơng pháp ELISA 30

3.3.3.2. Phƣơng pháp RT – PCR 32

3.3.3.3. Đổ gel điện di 38

Chƣơng 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 40

4.1. Kết quả phát hiện TSWV bằng kỹ thuật ELISA 40

4.1.1. Tỉ lệ nhiễm TSWV tại hai xã thuộc huyện Chợ Gạo 40

4.1.2. Tỉ lệ nhiễm TSWV tại hai xã thuộc thị xã Gò Công 41

4.1.3. Tỉ lệ nhiễm bệnh TSWV của huyện Chợ Gạo và thị xã Gò Công 42

4.1.4. Tỉ lệ nhiễm TSWV theo triệu chứng 43

4.2. Kết quả phát hiện TSWV bằng kỹ thuật RT – PCR44

4.2.1. Kết quả kiểm tra sản phẩm RNA 44

4.2.2. Kết quả điện di sản phẩm cDNA 45

4.2.3. Kết quả kiểm tra độ đặc hiệu của mồi 46

4.2.4. Kết quả phản ứng RT – PCR46

4.2.4.1. Phản ứng RT – PCR hai bƣớc 46

4.2.4.2. Phản ứng RT – PCR một bƣớc46

Chƣơng 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 48

5.1. Kết luận 48

5.2. Đề nghị 48

TÀI LIỆU THAM KHẢO 5