PHẦN I: GIỚI THIỆU 1

1.1. Đặt vấn đề 1

1.2. Mục đích 2

1.3. Yêu cầu 2

PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Đặc điểm sinh họcluận văn - báo cáo - tiểu luận chuyên ngành Sinh học của hệ miễn dịch tôm sú .3

2.1.1. Miễn dịch không đặc hiệu của giáp xác .3

2.1.2. Các tế bào máu tham gia vào đáp ứng miễn dịch của giáp xác 3

2.1.3. Hệ thống hoạt hóa prophenoloxidase .3

2.1.4. Hệ thống đông máu 6

2.1.5. Các chất ức chế proteinase .7

2.1.6. Hệ thống nhận diện không chuyên biệt 7

2.1.7. Các peptide kháng khuẩn .8

2.1.8. Peroxynectin .9

2.2. Bệnh đốm trắng và virus gây bệnh đốm trắng 9

2.2.1. Bệnh đốm trắng 9

2.2.1.1. Lịch sửluận văn - báo cáo - tiểu luận - tài liệu chuyên ngành Lịch Sử và phân bố 10

2.2.1.2. Triệu chứng, bệnh tích 11

2.2.2. Virus đốm trắng 11

2.2.2.1. Phân loại và tên gọi .11

2.2.2.2. Hình thái 12

2.2.2.3. Cấu trúc .13

2.3. Quá trình phát sinh bệnh của virus đốm trắng .15

2.3.1. Vật liệu gây bệnh 15

2.3.2. Cơ chế gây bệnh .16

2.3.3. Cơ chế lây lan .17

2.4. Mô hình cảm nhiễm chuẩn virus trên tôm .18

2.5. Phương pháp hóa mô miễn dịch .19

2.5.1. Nguyên lý 19

2.5.2. Kháng nguyên .20

2.5.3. Kháng thể 20

2.5.4. Phương pháp nhuộm .21

2.5.4.1. Phương pháp trực tiếp .21

2.5.4.2. Phương pháp gián tiếp 22

2.5.4.3. Phương pháp PAP (peroxidase anti – peroxidase method) 23

2.5.4.4. Phương pháp avidin – biotin complex (ABC method) .23

2.5.4.5. Phương pháp đánh dấu Streptavidin Biotin (LASB) 24

PHẦN III: VẬT LIỆU – PHưƠNG PHÁP .25

3.1. Thời gian và địa điểm .25

3.1.1. Thời gian 25

3.1.2. Địa điểm 25

3.2. Vật liệu .25

3.2.1. Vật liệu và dụng cụ sử dụng trong quá trình gây nhiễm thực nghiệm 25

3.2.1.1. Vật liệu .25

3.2.1.2. Dụng cụ .25

3.2.2. Các hóa chất và dụng cụ sử dụng trong IHC .26

3.2.2.1. Hóa chất 26

3.2.2.2. Vật tư 26

3.2.2.3. Thiết bị 26

3.3. Bố trí thí nghiệm .27

3.3.1. Tôm và điều kiện thí nghiệm 27

3.3.2. Virus đốm trắng dòng Việt Nam (WSSV-VN) .27

3.3.3. Gây nhiễm virus đốm trắng trên tôm sú 27

3.3.4. Thời gian theo dõi và thu mẫu để khảo sát quá trình phát sinh bệnh .28

3.4. Phương pháp nghiên cứu .28

3.4.1. Phương pháp pha loãng dịch virus 28

3.4.2. Phương pháp thu mẫu tôm .29

3.4.3. Phương pháp nhuộm IHC 30

3.4.4. Xử lý thống kê .34

PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 35

4.1. Độc lực của virus gốc dòng Việt Nam (WSSV-VN) .35

4.1.1. Các dấu hiệu lâm sàng và tỷ lệ gây chết 35

4.1.2. Tỷ lệ nhiễm của tôm thí nghiệm theo từng thời điểm .36

4.2. Khảo sát quá trình phát sinh bệnh của virus đốm trắng dòng Việt Nam

trên tôm sú 37

4.2.1. Quá trình phát sinh bệnh của WSSV-VN trên tôm sú

ở liều gây nhiễm thấp (101,5 SID50/ml) 38

4.2.2. Quá trình phát sinh bệnh của WSSV-VN trên tôm sú

ở liều cao (104,0 SID50/ml) 42

4.2.3. So sánh giữa hai liều gây nhiễm về quá trình phát sinh bệnh .46

4.3. Thảo luận 48

PHẦN V: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 50

5.1. Kết luận .50

5.2. Đề nghị .50

TÀI LIỆU THAM KHẢO .52