MỤC LỤC

LỜI CẢM ƠN .i

TÓM TẮT .iv

MỤC LỤC vi

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT .ix

DANH SÁCH CÁC HÌNH x

DANH SÁCH CÁC BẢNG .xi

DANH SÁCH CÁC ĐỒ THỊ . xii

PHẦN I 1

GIỚI THIỆU 1

1.1. Đặt vấn đề .1

1.2. Mục đích .2

1.3. Yêu cầu .2

1.4. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu 2

PHẦN II .3

TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Sơ lược về cây đu đủ (Carica papaya L .) .3

2.1.1. Phân loại học 3

2.1.2. Nguồn gốc, phân bố .4

2.1.3. Đặc điểm thực vật học 4

2.1.4. Nhu cầu sinh thái 5

2.1.5. Ý nghĩa kinh tế và giá trị dinh dưỡng của đu đủ 6

2.1.5.1. Giá trị dinh dưỡng .6

2.1.5.2. Ứng dụng thực tiễn 7

2.1.6. Tình hình sản xuất 8

2.1.7. Sâu bệnh .9

2.1.7.1. Các loài côn trùng gây hại chính .10

2.1.7.2. Các bệnh phổ biến trên đu đủ 10

2.2. Sơ lược về Papaya ringspot virus và tác hại của nó trên đu đủ 11

2.2.1. Khái niệm chung về bệnh virus hại thực vật 11

2.2.2. Virus gây bệnh đốm vòng- Papaya ringspot virus (PRSV) 15

2.2.3. Những phương pháp chẩn đoán bệnh virus PRSV 20

2.2.3.1. Phương pháp quan sát triệu chứng 20

2.2.3.2. Phương pháp cây chỉ thị 20

2.2.3.3. Phương pháp chẩn đoán bằng hiển vi điện tử .21

2.2.3.4. Phương pháp huyết thanh học .21

2.2.3.5. Phương pháp chẩn đoán sinh học phân tử .22

2.2.3.6. Các phương pháp khác 22

2.2.4. Sơ lược về phương pháp ELISA- Enzyme Linked Immunosorbent Assay .22

2.2.5. Sơ lược về kĩ thuật RT-PCR (Reverse Transcriptase- Polymerase Chain

Reaction) 24

PHẦN III .27

VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .27

3.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu 27

3.2. Phương pháp lấy mẫu .27

3.3. Phương pháp giám định bệnh đốm vòng trên đu đủ (Papaya Ringspot Desease)

28

3.3.1. Dụng cụ và thiết bị .28

3.3.2. Hóa chất .29

3.3.3. Quy trình thực hiện 31

3.3.3.1. Phương pháp ELISA .31

3.3.3.2. Phương pháp RT-PCR .35

PHẦN IV .39

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN .39

4.1. Hiện trạng canh tác cây đu đủ ở nơi lấy mẫu .39

4.2. Kết quả thu được từ thí nghiệm với bộ kit DAS- ELISA .40

4.2.1. Tỉ lệ nhiễm bệnh theo địa bàn điều tra 40

4.2.2. Tỉ lệ nhiễm bệnh theo giống cây .42

4.2.3. Tỉ lệ nhiễm bệnh theo tuổi cây .43

4.3. Kết quả thí nghiệm PCR .44

4.4. Kết quả giải trình tự một số mẫu 53

PHẦN V 56

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .56

5.1. Kết luận .56

5.2. Đề nghị 57

TÀI LIỆU THAM KHẢO .58

PHỤ LỤC 61

SỬ DỤNG KỸ THUẬT DAS-ELISA VÀ RT-PCR ĐỂ PHÁT HIỆN VIRUS GÂY BỆNH ĐỐM VÕNG TRÊN CÂY ĐU ĐỦ (Papaya ringspot virus) TẠI HAI TỈNH ĐỒNG NAI VÀ ĐỒNG THÁ