Chƣơng 1. MỞ ĐẦU 1

1.1. Đặt vấn đề 1

1.2. Mục đích và yêu cầu 2

1.2.1. Mục đích 2

1.2.2. Yêu cầu 3

Chƣơng 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

Chƣơng 3. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 7

3.1. Thời gian và địa điểm thực hiện khoá luận 7

3.2. Vật liệu 7

3.3. Phƣơng pháp thí nghiệm 8

3.2.1. Cấu trúc gen 8

3.2.1.1. Tiểu đơn vị epsilon ( ) của F0F1-ATP synthase 8

3.2.1.2. Protein huỳnh quang màu vàng (Venus9

3.2.1.3. Cấu trúc chung của các ATeam 10

3.2.1.4. Nhóm ATeam với EF1 12

3.2.1.5. Nhóm ATeam với BME 13

3.2.1.6. Nhóm ATeam với BCL 14

3.2.1.7. ATeam BPF -nVenus 16

3.2.2. Kiểm tra cấu trúc của các ATeam 16

3.2.2.1. Nhóm ATeam với monomeric Venus (nVenus) 16

3.2.2.2. Nhóm ATeam với cpVenus 18

3.2.3. Biểu hiện và tinh sạch protein tái tổ hợp 18

3.2.4. Đánh giá các ATeam in vitro 21

3.2.4.1. Đo quang phổ huỳnh quang của ATeam 20

3.2.4.2. Đo timecourse của ATeam 22

3.2.4.3. Công thức tính dynamic range 22

3.2.4.4. Công thức tính hằng số phân ly 22

3.2.4.5. Công thức tính tốc độ đáp ứng với ATP của ATeam 23

Chƣơng 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24

4.1. Kết quả thí nghiệm 24

4.1.1. Nhóm ATeam EF1 -nVenus và ATeam EF1 -cpVenus 24

4.1.2. Kết quả sắc ký lọc gel của ATeam BME-nVenus, BCL-nVenus, BPF-nVenus 26

4.1.3. Nhóm ATeam BME-nVenus và ATeam BME-cpVenus 27

4.1.5. ATeam BPF-nVenus 32

4.1.6. Nhóm ATeam với BCL 33

4.2. Thảo luận 42

Chƣơng 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 45

Chƣơng 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO 48