Chƣơng 1 MỞ ĐẦU 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Mục đích 2

1.3 Yêu cầu 2

Chƣơng 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1 Vài điều sơ lƣợc về cây lúa 3

2.1.1 Nguồn gốc và phân bố3

2.1.2 Đặc điểm hình thái của lúa 3

2.1.3 Đặc điểm hạt lúa 5

2.1.4 Điều kiện để hạt lúa nảy mầm 5

2.1.4.1 Nƣớc 5

2.1.4.2 Nhiệt độ 5

2.1.4.3 Không khí 6

2.2 Một số phƣơng pháp tách chiết protein tổng số từ thực vật 6

2.2.1 Quy trình có sử dụng SDS 7

2.2.2 Quy trình có sử dụng phenol 7

2.2.3 Quy trình có sử dụng PMSF8

2.3 Phƣơng pháp điện di trên gel polyacrylamide 8

2.3.1 Sơ lƣợc về lịch sử gel polyacrylamide và sự phát triển của phƣơng pháp điện di trên gel polyacrylamide 8

2.3.2 Gel polyacrylamide 9

2.3.3 Phƣơng pháp SDS- PAGE 10

2.3.4 Nhuộm gel sau khi điện di 11

2.3.5 Một số yếu tố cần quan tâm trong điện di trên gel polyacrylamide 13

2.3.6 Phƣơng pháp điện di hai chiều 14

2.4 Một số nghiên cứu liên quan đến điện di protein SDS- PAGE 16

2.4.1 Nghiên cứu trong nƣớc 16

2.4.2 Nghiên cứu ngoài nƣớc 17

Chƣơng 3 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 18

3.1 Thời gian và địa điểm thực hiện đề tài 18

3.2 Hóa chất và vật liệu dùng trong thí nghiệm 18

3.2.1 Thuốc sinh học 18

3.2.2 Hóa chất dùng trong ly trích18

3.2.3 Hóa chất điện di 19

3.2.4 Trang thiết bị thí nghiệm 19

3.3 Phƣơng pháp tiến hành nghiên cứu 19

3.3.1 Chuẩn bị mẫu và lấy mẫu 19

3.3.1.1 Chuẩn bị mẫu lúa 19

3.3.1.2 Xử lý thuốc và lấy mẫu 20

3.3.2 Ly trích protein tổng số từ lá lúa 21

3.3.2.1 Các bƣớc ly trích protein theo quy trình có sử dụng SDS 21

3.3.2.2 Các bƣớc ly trích protein theo quy trình có sử dụng phenol 21

3.3.2.3 Các bƣớc ly trích protein theo quy trình cải tiến có dụng SDS 22

3.3.3 Điện di kiểm tra mẫu protein đã ly trích 23

3.3.3.1 Chuẩn bị hóa chất 23

3.3.3.2 Chuẩn bị mẫu và chạy điện di 24

3.3.3.3 Tiến hành điện di và xem kết quả 24

3.3.4 Thí nghiệm khảo sát chọn điều kiện điện di 25

3.3.5 Khảo sát nồng độ gel 25

3.3.6 Điện di các mẫu protein để kiểm tra phản ứng của cây lúa đối với thuốc sinh học kích kháng 26

Chƣơng 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27

4.1 Kết quả ly trích protein tổng số 27

4.2 Kết quả khảo sát chọn điều kiện điện di 29

4.3 Ảnh hƣởng của nồng độ gel đến kết quả điện di 30

4.4 Đánh giá phản ứng của lúa đối với thuốc sinh học 32

4.4.1 Kết quả điện di của tất cả các mẫu protein trong 12 nghiệm thức 32

4.4.2 Kết quả điện di mẫu protein của lúa ở lô II 33

4.4.3 Kết quả điện di mẫu protein của lúa ở lô III 34

Chƣơng 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 35

5.1 Kết luận 35

5.2 Đề nghị 35

TÀI LIỆU THAM KHẢO 36