MỤC LỤC

PHỤ LỤC iii

GIỚI THIỆU 1

CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 2

1.1 Catharanthus 2

1.2 Catharanthus roseus (L).G.Don 2

1.2.1 Tên gọi 2

1.2.2 Đặc điểm thực vật 3

1.2.3 Phân bố 4

1.2.4 Phân loại 4

1.2.5 Trồng trọt và thu hoạch 5

1.2.6 Một số công dụng chủ yếu 6

CHƯƠNG 2:CÁC HỢP CHẤT ANKALOID TRONG CÂY C.roseus 8

2.1 Alkaloid trong loài Catharanthus roseus 8

2.1.1 Alkaloid 8

2.1.1.1 Khái niệm 8

2.1.1.2 Phân loại 8

2.1.1.3 Tính chất của các alkaloid 9

a. Tính chất vật lý 9

b. Tính chất hóa học 10

2.1.2 Alkaloid trong catharanthus 10

2.2 Các vinca alkaloid chính 13

2.2.1 Vinbastine 13

2.2.1.1 Công thức 13

2.2.1.2 Đặc điểm 13

2.2.2 Vincristine 14

2.2.2.1 Công thức 14

2.2.2.2 Đặc điểm 14

2.2.3 Sinh tổng hợp 15

2.2.4 Tác dụng dược lý , , 18

2.2.5 Ứng dụng trong y học 21

2.2.5.1 Vinblastin 21

2.2.5.2 Vincristine 23

CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP CHIẾT TÁCH 25

3.1 Phương pháp chiết tách dùng chất lưu siêu tới hạn 25

3.1.1 Khái niệm chiết suất siêu tới hạn: 25

3.1.2 Ưu điểm của SC-CO2 trong chiết xuất hoạt chất tự nhiên: 25

3.2 Phương pháp chiết tách dùng bình chiết Soxhlet 27

3.3 Phương pháp chiết tách solid – liquid 27

3.4 Phương pháp tách chiết bằng nước nóng 28

3.5 Sắc ký lỏng cao áp hiệu năng cao 29

3.5.1 Định nghĩa: 29

3.5.2 Cấu tạo và hoạt động của máy sắc ký lỏng cao áp HPLC 30

CHƯƠNG 4:PHƯƠNG PHÁP NUÔI CẤY IN VITRO TẾ BÀO C.roseus 31

4.1 Nuôi cấy mô và ý nghĩa của nuôi cấy mô 32

4.1.1 Giới thiệu 32

4.1.2 Tính ưu việt của nuôi cấy mô tế bào thực vật 32

4.1.3 Một số kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật. 32

4.1.3.1 Nuôi cấy cơ quan 32

4.1.3.2 Nuôi cấy mô phân sinh (meristem) 32

4.1.3.3 Nuôi cấy mô sẹo (callus) 33

4.1.3.4 Nuôi cấy huyền phù tế bào 33

4.1.3.5 Tạo phôi soma – tạo hạt nhân tạo 34

4.1.3.6 Nuôi cấy hạt phấn và bao phấn đơn bội 35

4.1.3.7 Nuôi cấy tế bào trần 35

4.1.4 Chất điều hòa sinh trưởng 35

4.1.4.1 Auxin 35

4.1.4.2 Cytokinin 36

4.1.4.3 Gibberellin 37

4.1.4.4 Acid abscisic 38

4.1.4.5 Ethylene 39

4.1.5 Môi trường nuôi cấy 40

4.1.5.1 Đường (nguồn carbohydrate) 40

4.1.5.2 Các muối khoáng đa lượng 41

4.1.5.3 Các muối khoáng vi lượng 41

4.1.5.4 Các vitamin và các chất kích thích sinh trưởng 41

4.1.5.5 Các chất bổ sung 41

4.2 Phương pháp nuôi cấy in vitro tế bào C.roseus 43

4.2.1 Nuôi cấy dịch huyền phù tế bào 43

4.2.2 Nuôi cấy mô sẹo 44

4.2.3 Nuôi hạt nhân tạo 45

4.2.4 Nuôi cấy mô phân sinh 45

4.2.5 Nuôi cấy rễ tơ 46

4.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình nuôi cấy tế bào C.roseus 47

4.3.1 Ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng 47

4.3.2 Ảnh hưởng của cường độ chiếu sáng. 49

4.3.3 Ảnh hưởng của nhiệt độ 49

4.3.4 Ảnh hưởng của nồng độ đường 50

KẾT LUẬN 51

TÀI LIỆU THAM KHẢO 52