Chƣơng 1 1

PHẦN MỞ ĐẦU 1

1.1. ĐẶT VẤN ĐỀ 1

1.2. MỤC ĐÍCH, YÊU CẦU 2

1.2.1. Mục đích 2

1.2.2. Yêu cầu 2

Chƣơng 2 3

TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Sơ lƣợc về E. coli 3

2.1.1. Nhắc lại về E. coli: 3

2.1.2. Đặc điểm E. coli 4

2.1.2.1. Tính chất vật lý, hóa học 4

2.1.2.2. Sức đề kháng 4

2.1.2.3. Cấu tạo kháng nguyên 4

2.1.2.4. Các chất do E. coli tổng hợp nên 6

2.1.2.5. Đặc tính gây bệnh 7

2.1.2.6. Các E. coli gây bệnh 8

2.1.2.7. Khả năng gây bệnh 9

2.1.2.8. Cơ chế phòng vệ của vật chủ đối với E. coli 10

2.1.2.9. Kiểm soát dich bệnh do E. coli 11

2.2. Sơ lƣợc về B. subtilis 11

2.2.1. Lịch sử phát hiện 11

2.2.2. Tìm hiểu về vi khuẩn Bacillus subtilis 12

2.2.2.1. Đặc điểm phân loại 12

2.2.2.2. Đặc điểm phân bố 12

2.2.2.3. Đặc điểm hình thái 12

2.2.2.4. Đặc điểm sinh hóa 14

2.2.2.5. Khả năng tạo bào tử 14

2.2.2.6. Các chất kháng sinh do B. subtilis tổng hợp 15

2.2.2.7. Tính đối kháng của Bacillus subtilis 16

2.2.2.8. Độc tính của Bacillus subtilis 17

2.2.2.9. Một số phƣơng pháp nghiên cứu tính đối kháng của Bacillus subtilis và vi sinh vật gây bệnh 18

2.2.2.10. Một số nghiên cứu ứng dụng của Bacillus subtilis 20

2.2.3. Tình hình nghiên cứu về tác dụng đối kháng với bệnh tiêu chảy do E.coli của Bacillus subtilis 21

Chƣơng 3 23

VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM 23

3.1. THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM 23

3.2. VẬT LIỆU THÍ NGHIỆM 23

3.2.1. Đối tƣợng khảo sát 23

3.2.2. Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm 23

3.2.3. Môi trƣờng nuôi cấy 23

3.2.4. Hóa chất 24

3.3. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 24

3.4. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24

3.4.1. Phân lập vi khuẩn B. subtilis từ đất24

3.4.1.1. Cách lấy mẫu 24

3.4.1.2. Phân lập vi khuẩn Bacillus subtilis 25

3.4.1.2.1 Lựa chọn khuẩn lạc 26

3.4.1.2.2 Kiểm tra đặc điểm sinh hóa 26

3.4.2. Đánh giá khả năng đối kháng của Bacillus subtilis và E. coli 26

3.4.2.1. Thí nghiệm 1: Thử đối kháng với E. coli trên môi trƣờng thạch TSA 26

3.4.2.2. Thí nghiệm 2:Khảo sát tính đối kháng từ dịch ly tâm của Bacillus subtilis và dịch khuẩn E. coli 27

3.4.2.3. Thí nghiệm 3: Khảo sát tính đối kháng của B. subtilis với nhiều nồng độ E. coli khác nhau trên môi trƣờng TSB 27

3.4.2.4. Thí nghiệm 4: Thử nghiệm khả năng đối kháng của 1 chủng B. subtilis và E. coli O157:H7 (chủng EDL 933) trên chuột bạch. 27

3.4.3. CHỈ TIÊU THEO DÕI VÀ PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ 28

3.4.4. Phƣơng pháp xử lý số liệu 29

Chƣơng 4 30

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 30

4.1. Kết quả phân lập B. subtilis trong đất 30

4.2. Kết quả đối kháng trực tiếp giữa B. subtilis và E. coli trên môi trƣờng TSA 32

4.3. Kết quả đối kháng giữa dịch ly tâm canh khuẩn B. subtilis nuôi cấy trong 24 giờ/370C với E. coli trên môi trƣờng TSA 35

4.4. Kết quả đối kháng giữa B. subtilis và E. coli trong môi trƣờng TSB 38

4.5. Kết quả đối kháng của chủng B. subtilis L211 đối với E. coli O157:H7 (chủng EDL 933) trên chuột bạch 41

Chƣơng 5 44

KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 44

5.1. Kết luận 44

5.2. Đề nghị 44

TÀI LIỆU THAM KHẢO 4