Chƣơng 1. MỞ ĐẦU 1

1.1. Đăt vấn đề 1

1.2. Mục đích và yêu cầu2

1.2.1. Mục đích 2

1.2.2. Yêu cầu 2

Chƣơng 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Nhân giống cây trồng in vitro 3

2.1.1. Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật 3

2.1.2. Cơ sở khoa học chung về nuôi cấy mô tế bào thực vật 3

2.1.3. Lợi ích của nhân giống bằng nuôi cấy mô tế bào thực vật 5

2.1.4. Các giai đoạn nhân giống in vitro 5

2.1.4.1. Giai đoạn 1: Khử trùng mô nuôi cấy 5

2.1.4.2. Giai đoạn 2: Tái sinh mẫu nuôi cấy 6

2.1.4.3. Giai đoạn 3: Nhân nhanh 6

2.1.4.4. Giai đoạn 4: Tạo cây hoàn chỉnh 6

2.1.4.5. Giai đoạn 5: Đƣa cây ra đất 7

2.1.5. Các yếu tố ảnh hƣởng đến quá trình nuôi cấy mô 7

2.1.5.1. Mô nuôi cấy 7

2.1.5.2. Vô trùng trong nuôi cấy 7

2.1.5.3. Điều kiện nuôi cấy 9

2.1.5.4. Môi trƣờng nuôi cấy 12

2.1.5.5. Vai trò của chất kích thích sinh trƣởng trong nuôi cấy 12

2.1.5.6. Ảnh hƣởng của pH và Agar 14

2.2. Giới thiệu về cây dầu mè (Jatropha curcas L.) 16

2.2.1. Vị trí phân loại 16

2.2.2. Đặc điểm sinh học 17

2.2.2.1. Mô tả 17

2.2.2.2. Sinh thái 18

2.2.3. Công dụng 19

2.2.3.1. Nhựa mủ 19

2.2.3.2. Lá, vỏ và rễ cây 19

2.2.3.3. Hạt và dầu 19

2.2.3.4. Dầu mè và nguyên liệu sinh học 20

2.2.4. Nhân giống 22

2.2.4.1. Phƣơng pháp nhân giống cổ truyền 22

2.2.4.2. Phƣơng pháp nhân giống hiện đại 23

ƣơng 3. VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25

3.1. Thời gian và địa điểm thí nghiệm 25

3.2. Vật liệu 25

3.2.1. Đối tƣợng thí nghiệm 25

3.2.2. Trang thiết bị và dụng cụ 25

3.2.3. Môi trƣờng nuôi cấy25

3.2.4. Điều kiện nuôi cấy in vitro27

3.3. Phƣơng pháp nghiên cứu 27

3.3.1. Phƣơng pháp khử trùng mẫu 27

3.3.2. Bố trí thí nghiệm 28

3.3.2.1. Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng của nồng độ chất khử trùng

và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ sống của mẫu cây dầu mè 28

3.3.2.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát môi trƣờng khoáng cơ bản thích hợp để nuôi cấy mô cây dầu mè in vitro 29

3.3.2.3. Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng của BA đến khả năng tạo chồi của cây dầu mè. 30

3.3.2.4. Thí nghiệm 4: Ảnh hƣởng của BA và IBA đến khả năng

tạo chồi của cây dầu mè trong điều kiện in vitro 31

3.3.2.5. Thí nghiệm 5: Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè in vitro 32

3.3.3. Phƣơng pháp xử lý số liệu 33

Chƣơng 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34

4.1. Thí nghiệm 1: Vô trùng mô cấy ban đầu từ cây thực sinh 34

4.1.1. Vô trùng mẫu hạt 35

4.1.2. Vô trùng mẫu chồi 36

4.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát môi trƣờng khoáng cơ bản cho cây dầu mè in vitro 39

4.3. Thí nghiệm 3: Ảnh hƣởng của BA đến sự hình thành chồi của cây dầu mè 41

4.4. Thí nghiệm 4: Ảnh hƣởng của BA và IBA đến sự hình thành chồi của cây dầu mè 43

4.5. Thí nghiệm 5: Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè in vitro 45

Chƣơng 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 47

5.1. Kết luận 47

5.2. Đề nghị 47

Chƣơng 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO 48

PHẦN PHỤ LỤC a