Tìm tài liệu

Su dung ky thuat rflp khao sat su da dang di truyen cua nam Rhizoctonia solani phan lap tu nhieu cay ky chu khac nhau

Sử dụng kỹ thuật rflp khảo sát sự đa dạng di truyền của nấm Rhizoctonia solani phân lập từ nhiều cây ký chủ khác nhau

Upload bởi: 11pm11111

Mã tài liệu: 235214

Số trang: 0

Định dạng: rar

Dung lượng file: 748 Kb

Chuyên mục: Nông Lâm nghiệp

Info

TÓM TẮT

NGUYỄN THỊ TIẾN SỸ, Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh. Tháng 9/2005. “SỬ DỤNG KỸ THUẬT RFLP KHẢO SÁT SỰ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA NẤM Rhizoctonia solani PHÂN LẬP TỪ NHIỀU CÂY KÝ CHỦ KHÁC NHAU”.

Giáo viên hướng dẫn:

ThS. TỪ THỊ MỸ THUẬN

Đề tài được thực hiện trên đối tượng là nấm Rhizoctonia solani. Đây là nấm có khả năng gây bệnh trên nhiều cây trồng khác nhau, ảnh hưởng rất lớn đến năng suất của cây trồng. Chúng tôi sử dụng kỹ thuật RFLP nhằm mục tiêu khảo sát sự đa dạng di truyền của các dòng nấm này, để dễ dàng cho việc đưa ra các biện pháp phòng trừ bệnh do nấm này gây ra. Đề tài được thực hiện tại phòng thực tập Bệnh cây khoa Nông Học và Trung tâm Phân Tích Thí Nghiệm trường Đại học Nông Lâm, Tp. Hồ Chí Minh, từ 01/03/05 đến 30/08/05.

Nội dung nghiên cứu:

1. Nhân sinh khối các dòng nấm R. solani.

2. Ly trích DNA của các dòng nấm R. solani.

3. Khuếch đại vùng rDNA-ITS của nấm R. solani bằng phương pháp PCR.

4. Thực hiện phản ứng cắt vùng rDNA-ITS đã được khuếch đại bằng các enzyme cắt hạn chế.

5. Phân tích sự đa dạng di truyền của các dòng nấm R. solani dựa trên kết quả cắt của các enzyme.

Kết quả đạt được:

1. Thu sinh khối và ly trích DNA của 45 dòng nấm R. solani.

2. Cải tiến quy trình PCR để khuếch đại vùng rDNA-ITS của nấm R. solani với cặp primer ITS 4 và ITS 5.

3. Khuếch đại được vùng rDNA-ITS của các dòng nấm R. solani.

4. Với 9 dòng nấm RM-61, BV-61-02, CX-8-02, CTĐ-77, BV-62-03, KT-63-01, XL-4, L-73 và ĐHL-63, khi cắt với các enzyme hạn chế Alu I, Hae III, và Taq I cho ra các đoạn cắt giới hạn có kích thước khác nhau. Phân tích ITS-RFLP cho thấy, 7 dòng nấm R. solani nói trên (trừ 2 dòng L-73, và ĐHL-63) thuộc 6 nhóm khác nhau.

MỤC LỤC

PHẦN TRANG

Trang bìa

Trang tựa

Lời cảm ơn iii

Tóm tắt iv

Mục lục v

Danh sách các hình viii

Danh sách các bảng ix

Danh sách chữ viết tắt x

Phần I. MỞ ĐẦU 1

1.1. Đặt vấn đề 1

1.2. Mục tiêu 1

1.3. Yêu cầu của đề tài 2

1.4. Giới hạn của đề tài 2

Phần II. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Giới thiệu về nấm Rhizoctonia solani 3

2.1.1. Đặc điểm hình thái 3

2.1.2. Đặc điểm sinh lý 4

2.1.3. Đặc điểm nuôi cấy 4

2.2. Điều kiện phát sinh bệnh 4

2.3. Phạm vi ký chủ của nấm R. solani 5

2.4. Sự phân nhóm của nấm R. solani 6

2.5. Các phương pháp phân tử thường dùng để nghiên cứu sự đa dạng di truyền của nấm R. solani 8

2.5.1. Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) 8

2.5.1.1. Nguyên tắc của phương pháp PCR 8

2.5.1.2. Các thành phần cần thiết để thực hiện phản ứng PCR 8

2.5.1.3. Tiến hành phản ứng PCR 9

2.5.1.4. Các nhân tố ảnh hưởng đến phản ứng PCR 10

2.5.1.5. Lợi ích của phản ứng PCR 10

2.5.2. Phương pháp RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) 11

2.5.2.1. Restriction endonuclease 11

2.5.2.2. Nguyên tắc của phương pháp 11

2.5.2.2. Quy trình của phương pháp 11

2.6. Cơ sở khoa học của việc sử dụng đoạn rDNA-ITS trong nghiên cứu sự

đa dạng di truyền của nấm R. solani 12

2.6.1. Giới thiệu về vùng rDNA 12

2.6.2. Sử dụng vùng rDNA để nghiên cứu sự đa dạng di truyền 14

2.7. Một số nghiên cứu trong nước và ngoài nước về sự đa dạng của nấm

R. solani 15

2.7.1. Nghiên cứu ngoài nước 15

2.7.2. Nghiên cứu trong nước 17

Phần III. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 18

3.1. Thời gian và địa điểm 18

3.2. Nội dung nghiên cứu 18

3.3. Nguồn nấm Rhizoctonia solani 18

3.4. Phương pháp tiến hành 18

3.4.1. Phục hồi và nhân sinh khối nấm R. solani 18

3.4.2. Ly trích DNA tổng số (isolation of DNA) của nấm R. solani 19

3.4.3. Khuếch đại vùng rDNA-ITS của các dòng nấm R. solani 21

3.4.4. Điện di và đọc kết quả PCR trên gel agarose 22

3.4.5. Phân tích RFLP vùng rDNA-ITS của các dòng nấm R. solani 23

Phần IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24

4.1. Ly trích DNA tổng số của nấm R. solani 24

4.2. Khuếch đại vùng rDNA-ITS thông qua phản ứng PCR 25

4.2.1. Lượng DNA khuôn 25

4.2.2. Khảo sát chu trình nhiệt 26

4.2.3. Khảo sát nồng độ primer 27

4.2.4. Kết quả khuếch đại vùng rDNA-ITS của nấm R. solani 28

4.3. Phân tích RFLP vùng rDNA-ITS của các dòng nấm R. solani 29

Phần V. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 33

5.1 Kết luận 33

5.2. Đề nghị 33

Phần VI. TÀI LIỆU THAM KHẢO 34

Phần VII. PHỤ LỤC 37

SỬ DỤNG KỸ THUẬT RFLP KHẢO SÁT SỰ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA NẤM Rhizoctonia solani PHÂN LẬP TỪ NHIỀU CÂY KÝ CHỦ KHÁC NHA

GỢI Ý

Những tài liệu gần giống với tài liệu bạn đang xem

Sử dụng kỹ thuật rflp khảo sát sự đa dạng di ...

Upload: meomeo0088

📎 Số trang: 44
👁 Lượt xem: 638
Lượt tải: 17

Phân tích đa dạng di truyền một số mẫu nấm ...

Upload: tuanxd2009

📎 Số trang: 66
👁 Lượt xem: 547
Lượt tải: 16

Phân tích đa dạng di truyền một số mẫu nấm ...

Upload: ntphuongtdh

📎
👁 Lượt xem: 493
Lượt tải: 16

XÁC ĐỊNH GEN GÂY ĐỘC VÀ TÍNH ĐA DẠNG DI ...

Upload: takeshi76113

📎 Số trang: 73
👁 Lượt xem: 589
Lượt tải: 16

Xác định gen gây độc và tính đa dạng di ...

Upload: huyphatnguyen

📎 Số trang: 73
👁 Lượt xem: 488
Lượt tải: 16

Bước đầu đọc trình tự vùng rDNA ITS của nấm ...

Upload: vinguyen_ibm

📎 Số trang: 41
👁 Lượt xem: 612
Lượt tải: 16

Bước đầu đọc trình tự vùng rdna its của nấm ...

Upload: vananh8x

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 634
Lượt tải: 16

Đánh giá đa dạng tập đoàn giống lúa có tính ...

Upload: errorwebcam

📎 Số trang: 33
👁 Lượt xem: 581
Lượt tải: 19

Nghiên cứu bước đầu về sử dụng kỹ thuật lai ...

Upload: tuannvbn

📎 Số trang: 32
👁 Lượt xem: 586
Lượt tải: 17

Phân biệt sự khác nhau trong đánh giá đất ...

Upload: haigames45

📎
👁 Lượt xem: 546
Lượt tải: 16

Ứng dụng kỹ thuật PCR RFLP xác định các kiểu ...

Upload: ac_eco_it

📎 Số trang: 52
👁 Lượt xem: 524
Lượt tải: 16

Kỹ thuật khai thác mũ cao su tại Thừa Thiên ...

Upload: nguyenphankhue

📎 Số trang: 7
👁 Lượt xem: 364
Lượt tải: 16

QUAN TÂM

Những tài liệu bạn đã xem

Sử dụng kỹ thuật rflp khảo sát sự đa dạng di ...

Upload: 11pm11111

📎 Số trang: 0
👁 Lượt xem: 456
Lượt tải: 16

CHUYÊN MỤC

Nông Lâm nghiệp
Sử dụng kỹ thuật rflp khảo sát sự đa dạng di truyền của nấm Rhizoctonia solani phân lập từ nhiều cây ký chủ khác nhau TÓM TẮT NGUYỄN THỊ TIẾN SỸ, Đại học Nông Lâm Tp. Hồ Chí Minh. Tháng 9/2005. “SỬ DỤNG KỸ THUẬT RFLP KHẢO SÁT SỰ ĐA DẠNG DI TRUYỀN CỦA NẤM Rhizoctonia solani PHÂN LẬP TỪ NHIỀU CÂY KÝ CHỦ KHÁC NHAU”. Giáo viên hướng dẫn: ThS. TỪ THỊ MỸ THUẬN Đề tài zip Đăng bởi
5 stars - 235214 reviews
Thông tin tài liệu 0 trang Đăng bởi: 11pm11111 - 03/12/2024 Ngôn ngữ: Việt nam, English
5 stars - "Tài liệu tốt" by , Written on 03/12/2024 Tôi thấy tài liệu này rất chất lượng, đã giúp ích cho tôi rất nhiều. Chia sẻ thông tin với tôi nếu bạn quan tâm đến tài liệu: Sử dụng kỹ thuật rflp khảo sát sự đa dạng di truyền của nấm Rhizoctonia solani phân lập từ nhiều cây ký chủ khác nhau