1. MỞ ĐẦU

1.1. Đặt vấn đề 1

1.2. Mục đích của đề tài 2

1.3. Yêu cầu 2

1.4. Hạn chế 2

2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1. Nấm trồng 3

2.1.1. Khái quát về nấm và hình thái học 3

2.1.1.1. Khái quát về nấm 3

2.1.1.2. Hình thái học sợi nấm 4

2.1.1.3. Hình thái học quả thể nấm 5

2.1.2. Sinh lý và biến dưỡng nấm 5

2.1.2.1. Biến dưỡng của sợi nấm 5

2.1.2.2. Sự sinh trưởng của sợi nấm 6

2.1.3. Các giai đoạn phát triển nấm 8

2.1.3.1. Giai đoạn sinh trưởng 8

2.1.3.2. Giai đoạn phát triển 9

2.2. Nấm Linh chi 9

2.2.1. Khái quát chung 9

2.2.2. Vị trí phân loại 10

2.2.3. Đặc điểm hình thái và chu trình sống của nấm Linh chi 10

2.2.3.1. Đặc điểm hình thái của nấm Amauroderma subresinosum 10

2.2.3.2. Chu trình sống sống của nấm Linh chi 11

2.2.4. Điều kiện sống của nấm Linh chi 12

2.3. Nguyên liệu trồng nấm 12

2.4. Thành phần hóa học và đặc tính dược lý của nấm Linh chi 14

2.5. Khả năng chữa bệnh của nấm Linh chi 17

2.6. Giới thiệu sơ lược về hoạt chất sinh học có trong nấm Linh chi 20

2.6.1. Ganoderma polysaccharides (GLPs) 20

2.6.2. Ganoderic Acid 21

2.6.3. Ganoderma Adenosin 22

2.6.4. Alcaloid 22

2.6.4.1. Định nghĩa. 22

2.6.4.2. Tính chất 22

2.6.4.3. Công dụng 23

2.6.5. Hợp chất Saponin 23

2.6.5.1. Khái niệm chung về Saponin 23

2.6.5.2. Công dụng 24

2.6.6. Germanium hữu cơ 24

2.7. Phương pháp ổn định dược liệu 24

2.7.1. Chuẩn bị dịch chiết 25

2.7.2. Phương pháp ngâm 25

3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM

3.1. Thời gian và địa điểm thí nghiệm 26

3.2. Đối tượng thí nghiệm 26

3.3. Vật liệu thí nghiệm 26

3.3.1. Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm 26

3.3.2. Hóa chất 26

3.3.3. Môi trường nuôi cấy 26

3.3.3.1. Môi trường dinh dưỡng 26

3.3.3.2. Môi trường nhân giống 28

3.3.3.3. Môi trường mạt cưa cao su 28

3.4. Phương pháp thí nghiệm 28

3.4.1. Quan sát hình thái quả thể nấm Linh chi đen (Amauroderma subresinosum) 28

3.4.1.1. Hình thái quả thể nấm Linh chi đen 28

3.4.1.2. Phương pháp quan sát hệ sợi nấm Linh chi đen 28

3.4.1.3. Phương pháp quan sát bào tử nấm Linh chi đen 28

3.4.2. Khảo sát sinh trưởng sợi nấm Linh chi đen trên môi trường thạch 28

3.4.3. Nghiên cứu quá trình lên men dịch thể 29

3.4.4. Khảo sát sinh trưởng hệ sợi nấm Linh chi đen trên môi trường nhân giống 30

3.4.5. Khảo sát sinh trưởng và phát triển nấm Linh chi đen trên môi trường mạt cưa cao su 30

3.5. Xác định dược chất có trong nấm Linh chi đen 31

3.5.1. Phương pháp định tính Alcaloid 31

3.5.1.1. Chuẩn bị dịch thử 31

3.5.1.2. Thuốc thử định tính alcaloid 32

3.5.2. Phương pháp xác định hợp chất Saponin 32

3.5.2.1. Thử nghiệm tính tạo bọt 32

3.5.2.2. Thử nghiệm Fontan – Kaudel 33

3.5.3. Định tính Triterpenoid (bằng phản ứng Liebermann - Burchard) 33

3.5.4. Định tính acid hữu cơ 33

3.6. Định lượng polysarcharide (GLPs) 34

3.7. Phương pháp xử lý số liệu 35

4. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN

4.1. Quan sát hình thái nấm Amauroderma subresinosum 36

4.1.1. Hệ sợi nấm Amauroderma subresinoum 36

4.1.2. Cấu trúc bào tử nấm Amauroderma subresinosum 36

4.1.3. Hình thái quả thể nấm Amauroderma subresinosum 37

4.2. Sinh trưởng và phát triển của nấm Linh chi đen (Amauroderma subresinosum) .38

4.2.1. Tốc độ sinh trưởng hệ sợi nấm Linh chi đen trên các môi trường thạch .38

4.2.2. Sự sinh trưởng hệ sợi nấm Linh chi đen trên môi trường nhân giống 40

4.2.3. Sự sinh trưởng hệ sợi nấm Linh chi đen trên môi trường lỏng 42

4.2.4. Sự sinh trưởng và phát triển nấm Linh chi đen trên môi trường mạt cưa cao su 43

4.2.4.1. Giai đoạn sinh trưởng hệ sợi nấm Linh chi đen 45

4.2.4.2. Giai đoạn phát triển quả thể nấm Linh chi đen 46

4.2.4.3. Đánh giá hiệu suất sinh học trồng nấm Linh chi đen 48

4.3. Xác định dược chất có trong hệ sợi và quả thể nấm Linh chi đen 49

4.3.1. Định tính Alcaloid 49

4.3.2. Định tính Saponin 51

4.3.2.1. Thử nghiệm tính tạo bọt 51

4.3.2.2. Thử nghiệm Fontan – Kaudel 51

4.3.3. Định tính Triterpenoid 52

4.3.4. Định tính acid hữu cơ 52

4.3.5. Định lượng polysaccharide từ quả thể nấm Linh chi đen 53

5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ

5.1. Kết luận 54

5.2. Đề nghị 54

6. TÀI LIỆU THAM KHẢO

7. PHỤ LỤ