Trang nhan đề

Lời cảm ơn

Mục lục

Danh mục các ký hiệu và chữ viết tắt

Danh mục các bảng

Danh mục các hình vẽ

Mở đầu

Chương_1: Tổng quan tài liệu

Chương_2: Vật liệu và phương pháp

Chương_3: Kết quả và biện luận

Chương_4: Kết luận và kiến nghị

Tài liệu tham khảo

MụC LụC

TRANG

MụC LụC . i

DANH MụC CÁC KÝ HIEU VÀ CH VIÊT TAT iii

DANH MụC CÁC BNG iv

DANH MụC CÁC HÌNH VE . v

Mở đÂU 1

Chương I TổNG QUAN TÀI LIỆU . 2

I.1. INTERFERON 2

I.1.1. Các dạng Interferon . 2

I.1.2. Cơ chê hoạt động của Interferon 4

I.1.3. Các ứng dụng của Interferon . 6

I.1.4. Tình hình nghiên cứu Interferon hiện nay 8

I.2. HỆ THỐNG BIỂU HIỆN PICHIA PASTORIS 8

I.2.1. Các hệ thống biểu hien Interferon alpha 2b . 8

I.2.2. Ưu nhược điểm của hệ thống biểu hiện Pichia pastoris . 10

Chương II VậT LIệUVÀ PHƯƠNG PHÁP . 12

II.1. VậT LIệU 12

II.1.1. Dụng cụ và thiết bị 12

II.1.2. Hóa chât và môi trường . 13

II.1.3. Nguyên vật liệu . 15

II.2. PHƯƠNG PHÁP . 20

II.2.1. Tách chiêt DNA người tong sô bang Chelex 20

II.2.2. Phương pháp PCR (dùng đe khuêch đi đon gene mc tiêu và kiem tra

khuan lc mang gene mc tiêu) 20

II.2.3. Phương pháp tinh sạch DNA từ gel agarose . 21

II.2.4. Phương pháp đien biên np cho E. coli 21

II.2.5. Phương pháp củat DNA bang enzyme củat gii hn 22

II.2.6. Phương pháp nôi DNA bang enzyme T4 ligase 22

II.2.7. Phương pháp tách chiêt plasmid t tê bào E. coli . 23

II.2.8. Phương pháp đien biên np cho Pichia pastoris . 23

II.2.9. Phương pháp lai khuan lc . 24

II.2.10. Phương pháp lên men Pichia pastoris 24

II.2.11. Phương pháp Bradford dùng đe đo hàm lưng protein . 25

II.2.12. Phương pháp đien di SDS-PAGE 25

II.2.13. Phương pháp Western blot . 27

Chương III KÊT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN . 28

III.1. TẠO DÒNG ESCHERICHIA COLI MANG GENE MÃ HÓA CHO

INTERFERON ALPHA 2B CỦA NGƯỜI 28

III.1.1. Tổng hợp gene mã hóa cho Interferon alpha 2b của người . 28

III.1.2. Tạo dòng Escherichia coli DH5α mang vector nhân dòng gene mã hóa

Interferon alpha 2b của người 30

III.2. TẠO DÒNG PICHIA PASTORIS BIểU HIệN INTERFERON ALPHA

2B CủA NGƯỜI . 34

III.2.1. Tạo dòng Escherichia coli DH5α mang vector biểu hiện Interferon alpha

2b của người 34

III.2.2. To dòng Pichia pastoris có khả" năng biểu hiện Interferon alpha 2b của

người 37

III.3. BIểU HIệN INTERFERON ALPHA 2B CủA NGƯỜI . 38

Chương IV KÊT LUAN VÀ KIÊN NGH . 43

IV.1. Kêt luan 43

IV.2. Kiên ngh 43

TÀI LIEU THAM KH