Tìm tài liệu

Phan lap va bieu hien gen fljB ma hoa khang nguyen roi H 1 2 cua Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL2

Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng nguyên roi H 1 2 của Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL2

Upload bởi: tien200895

Mã tài liệu: 237956

Số trang: 0

Định dạng: rar

Dung lượng file: 2,483 Kb

Chuyên mục: Tổng hợp

Info

Đề tài: Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng nguyên roi H: 1,2 của Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL21

mục lục

Lời nói đầu 1

Chương 1: Tổng quan về tài liệu 3

1.1 Khái quát chung về Salmonella 3

1.1.1. Tình hình dịch bệnh do Salmonella 3

1.1.2. Một số đặc điểm vi sinh của Salmonella 4

1.1.3. Phân loại Salmonella 4

1.1.4. Bệnh học của sự lây nhiễm Salmonella 5

1.1.5. Sự đề kháng của Salmonella với các chất kháng sinh 6

1.2. Kháng nguyên của Salmonella 8

1.2.1. Đặc điểm chung về kháng nguyên của Salmonella 7

1.2.1.1. Kháng nguyên thân 8

1.2.1.2. Kháng nguyên tua riềm 8

1.2.1.3. Kháng nguyên roi H 8

1.2.1.3.1.Cấu trúc protein flagellin của Salmonella 9

1.2.1.3.2. Quá trình hình thành flagella trong Salmonella 10

1.2.1.3.3 Cơ chế điều hoà biểu hiện protein roi (H) ở vi khuẩn Salmonella typhimurium 12

1.2.2. Vai trò kháng nguyên H trong đáp ứng miễn dịch bảo hộ phòng chống salmonella 14

1.3. Vacxin 16

1.3.1. Khái quát về vacxin 16

1.3.2. Phân loại vacxin 18

1.4. Phân lập và biểu hiện gen 24

1.4.1. Phân lập gen 24

1.4.1.1. Phân lập gen từ ngân hàng gen 24

1.4.1.2. Phân lập gen bằng kỹ thuật pCR 24

1.4.2. Biểu hiện gen 25

1.4.2.1.Hệ biểu hiện gen trong E. coli BL21 25

1.4.2.2. Hệ vector biểu hiện pET32a(+) 25

1.4.2.3. Chủng biểu hiện E. coli BL21 26

Chương 2: Nguyên liệu và phương pháp nghiên cứu 28

2.1. Nguyên liệu 28

2.1.1. Chủng sinh vật 28

2.1.2. plasmit 28

2.1.3. Môi trường nuôi cấy 28

2.1.4. Các dung dịch sử dụng 28

2.1.5. Hoá chất, enzyme, thiết bị 29

2.2. Phương pháp nghiên cứu 30

2.2.1. Phương pháp tách chiết ADN hệ gen của vi khuẩn 30

2.2.2 Khuếch đại gen fljB bằng kỹ thuật PCR 31

2.2.3. Xử lý ADN bằng enzim hạn chế 31

2.2.4. Quá trình tinh sạch ADN từ gel agaroza bằng cột QUIAGEN 32

2.2.5. Phản ứng nối ghép gen ngoại lai vào plasmit 32

2.2.6. Biến nạp sản phẩm ghép gen vào E. coli bằng sốc nhiệt 33

2.2.7. Tách chiết AND plasmit từ E. coli 34

2.2.8. Cảm ứng, biểu hiện protein tái tổ hợp 35

2.2.9. Phương pháp điện di ADN trên gel agaroza 36

2.2.10. Phương pháp điện di protein trên gel polyacrylamit 12,6% 37

2.2.11. Tinh sạch protein qua cột sắc ký ái lực His-tag 37

Chương 3: Kết quả nghiên cứu và thảo luận 39

3.1. Tách chiết ADN hệ gen của S. typhimurium 41

3.2. Khuếch đại gen fljB bằng kỹ thuật PCR 42

3.3. Tách dòng gen fljB 44

3.3.1. Đưa gen fljB vào véc tơ tách dòng PCR 2.1 44

3.3.1.1.Biến nạp sản phẩm nối ghép gen vào tế bào E. coli DH5ỏ 45

3.3.1.2. Chọn lọc các cá thể mang plasmit tái tổ hợp 46

3.3.2. Cắt kiểm tra plasmit tái tổ hợp PCRfljB 47

3.3.3.kiểm tra gen fljB trong pCR2.1 bằng giải trình tự gen 50

3.4. Thiết kế vectơ biểu hiện mang gen fljB 51

3.4.1. Thu gen fljB từ plasmit tái tổ hợp pCRfljB 51

3.4.2. Phản ứng nối ghép fljB và véc tơ pET32a (+) 51

3.4.3. Chọn lọc thể biến nạp mang plasmit tái tổ hợp 51

3.4.4. Cắt kiểm tra plasmit tái tổ hợp pET32fljB 52

3.5. Biểu hiện gen fljB trong E.coli BL21 54

3.6. Nghiên cứu một số điều kiện thích hợp để tối ưu biểu hiện protein tái tổ hợp fljB của E. coli 55

3.6.1. Nhiệt độ cảm ứng ảnh hưởng lên khả năng biểu hiện gen fljB 55

3.6.2. Nồng độ cảm ứng IPTG ảnh hưởng lên khả năng biểu hiện gen fljB 59

3.6.3. Thời gian cảm ứng ảnh hưởng lên khả năng biểu hiện gen fljB 60

3.7. Tinh sạch protein tái tổ hợp FljB 61

Kết luận 64

Định hướng nghiên cứu 64

Tài liệu tham khảo 6

GỢI Ý

Những tài liệu gần giống với tài liệu bạn đang xem

Tạo kháng nguyên tái tổ hợp m1 của virus cúm ...

Upload: daucolamgia

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 499
Lượt tải: 16

Biểu hiện protein ha tái hỗn hợp của virus ...

Upload: vnck2010

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 467
Lượt tải: 16

Thu nhận insulin người tái tổ hợp từ mô hình ...

Upload: tuanhangeasy

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 715
Lượt tải: 16

Thiết kế vector biểu hiện gen mã hóa ...

Upload: nguyenhongquan_vp661986

📎 Số trang: 69
👁 Lượt xem: 448
Lượt tải: 16

Phát hiện phân biệt salmonella spp ...

Upload: tvgs02

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 641
Lượt tải: 16

Tạo dòng và biểu hiện gen mã hóa cho mini ...

Upload: dangmaichi

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 678
Lượt tải: 16

Tạo dòng và biểu hiện g cse người tái tổ hợp ...

Upload: cacuong321

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 532
Lượt tải: 16

Tạo kháng nguyên tái tổ hợp kháng thể đa ...

Upload: sonnsi2010

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 489
Lượt tải: 17

Tạo dòng tế bào nấm men saccharomyces ...

Upload: haitran2511

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 611
Lượt tải: 17

Nghiên cứu chế tạo bộ thử nghiệm elisa phát ...

Upload: hungcuong_owen

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 531
Lượt tải: 16

Tạo dòng nấm men saccharomyces cerevisuae ...

Upload: minhha042004

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 508
Lượt tải: 16

Khảo sát biểu hiện gen 1 Aminocyclopropane 1 ...

Upload: traitimkhomau_442

📎 Số trang: 1
👁 Lượt xem: 475
Lượt tải: 16

QUAN TÂM

Những tài liệu bạn đã xem

Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng ...

Upload: tien200895

📎 Số trang: 0
👁 Lượt xem: 470
Lượt tải: 16

CHUYÊN MỤC

Tổng hợp
Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng nguyên roi H 1 2 của Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL2 Đề tài: Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng nguyên roi H: 1,2 của Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL21 mục lục Lời nói đầu 1 Chương 1: Tổng quan về tài liệu 3 1.1 Khái quát chung về Salmonella 3 1.1.1. Tình hình dịch bệnh do zip Đăng bởi
5 stars - 237956 reviews
Thông tin tài liệu 0 trang Đăng bởi: tien200895 - 29/03/2024 Ngôn ngữ: Việt nam, English
5 stars - "Tài liệu tốt" by , Written on 29/03/2024 Tôi thấy tài liệu này rất chất lượng, đã giúp ích cho tôi rất nhiều. Chia sẻ thông tin với tôi nếu bạn quan tâm đến tài liệu: Phân lập và biểu hiện gen fljB mã hoá kháng nguyên roi H 1 2 của Salmonella typhimurium trong Escherichia coli BL2