TÓM TẮT

Enterotoxigenic E. coli là nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy phổ biến trên heo

con và heo đang cai sữa, trong khi những hạn chế của kháng sinh trong việc khống chế

E. coli gây bệnh tiêu chảy, thì các chế phẩm sinh học từ Bacillus subtilis chưa thực sự

hiệu quả trong phòng và trị bệnh. Trong đề tài này chúng tôi phân lập các chủng

Bacillus subtilis trong phân heo có khả năng ức chế mạnh sự phát triển của E. coli gây

bệnh tiêu chảy trên heo.

Chúng tôi phân lập được 22 chủng Bacillus subtilis trong phân heo, có 13

chủng tạo được vòng kháng khuẩn với E. coli, có thể sự tổng hợp của kháng sinh ức

chế sự phát triển của E. coli được kích thích bởi một nồng độ E. coli đủ lớn, kháng

sinh được Bacillus subtilis tổng hợp từ giai đoạn rất sớm của sự phát triển ( 0 giờ - 12

giờ ) khi có sự hiện diện của E. coli. Có 5 chủng cho thấy sự ức chế mạnh mẽ E. coli

và nhạy cảm với các loại kháng sinh được thử nghiệm trừ colistin

MỤC LỤC

CHưƠNG

TRANG

Trang tựa

Lời cảm tạ .i

Tóm tắt . ii

Mục lục iii

Danh mục các chữ viết tắt .iv

Danh sách các hình v

Danh sách các bảng .vi

1. MỞ ĐẦU 1

1.1.Đặt vấn đề 1

1.2.Mục đích và yêu cầu 2

2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1.E. coli gây bệnh tiêu chảy . 3

2.2. Enterotoxigenic E. coli 4

2.2.1. Độc tố nhạy nhiệt LT 4

2.2.1.1. Cấu tạo của LT-1 4

2.2.1.2. Cơ chế tác động của độc tố LT-1 . 4

2.2.2. Độc tố kháng nhiệt 5

2.2.2.1. Độc tố kháng nhiệt STa 5

2.2.2.2. Độc tố kháng nhiệt STb 6

2.2.3. Yếu tố gắn vào thành tế bào ruột của ETEC . 7

2.3. Chế phẩm sinh học 9

2.3.1. Định nghĩa . 9

2.3.2. Cơ chế tác động 9

2.3.3. Ứng dụng của chế phẩm sinh học 9

2.3.4. Yêu cầu của chế phẩm sinh học 10

2.3.5. Đặc điểm của chế phẩm sinh học ở dạng bào tử Bacillus subtilis 10

2.4.Bacillus subtilis . 11

2.4.1. Đặc điểm phân loại 11

2.4.2. Đặc điểm hình thái 11

2.5. Kháng sinh được tổng hợp bởi Bacillus subtilis 13

2.5.1. Giới thiệu 13

2.5.2. Peptide antibiotic được tổng hợp bằng ribosome . 14

2.5.2.1. Subtilin . 14

2.5.2.2. Subtilosin 15

2.5.2.3. Sublancin 16

2.5.2.4. TasA . 16

2.5.3. Peptide antibiotic không được tổng hợp bằng ribosome . 18

2.5.3.1. Surfactin . 17

2.5.3.2. Fengycin . 19

2.5.3.3. Mycosubtilin . 29

2.5.3.4. Bacilysocin . 20

3. VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 22

3.1. Thời gian và địa điểm thực hiện đề tài 22

3.1.1. Thời gian . 22

3.1.2. Địa điểm 22

3.2. Vật liệu thí nghiệm . 22

3.2.1. Mẫu thí nghiệm . 22

3.2.2. Hóa chất . 22

3.2.3. Thiết bị và dụng cụ thí nghiệm 22

3.3. Phương pháp nghiên cứu . 22

3.3.1. Phân lập vi khuẩn Bacillus subtilis trong phân heo 22

3.3.2. Các phản ứng thử sinh hóa 23

3.3.3. Thử đối kháng với E. coli trên môi trường TSA . 24

3.3.4. Đánh giá sự đối kháng với E. coli trên môi trường TSB 24

3.3.5. Thử kháng sinh đồ . 24

3.3.6. Đánh giá khảnăng phân giải tinh bột trên môi trường thạch tinh bột 1% . 24

4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN . 25

4.1. Kết quả 25

4.1.1. Kết quả phân lập Bacillus subtilis trong phân heo 25

4.1.2. Kết quả thử đối kháng với E. coli trên môi trường TSA . 27

4.1.3. Kết quả đối kháng trên môi trường TSB . 29

4.1.4. Kết quả thử kháng sinh đồ . 30

4.1.5. Kết quả đánh giá khả năng phân giải tinh bột . 32

4.2. Thảo luận 32

5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 33

5.1. Kết luận . 33

5.2. Đề nghị 33

TÀI LIỆU THAM KHẢO . 34

PHỤ LỤC 3