Trang tựa: i

LỜI CẢM TẠ . ii

TÓM TẮT iii

MỤC LỤC . iv

DANH SÁCH CÁC HÌNH . vii

DANH SÁCH CÁC BẢNG viii

Chương 1 MỞ ĐẦU 1

1.1 Đặt vấn đề 1

1.2 Mục tiêu và yêu cầu . 2

1.2.1 Mục tiêu 2

1.2.2 Yêu cầu . 2

Chương 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3

2.1 Lịch sử phát triển nuôi cấy mô . 3

2.1.1 Một số kết quả tiêu biểu trong lĩnh vực nuôi cấy mô thực vật trên thế giới . 3

2.1.2 Sơ lược quá trình phát triển nuôi cấy mô tế bào thực vật ở Việt Nam 5

2.2 Các phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 6

2.2.1 Nuôi cấy đỉnh sinh trưởng . 6

2.2.2 Nuôi cấy mô sẹo . 6

2.2.3 Nuôi cấy tế bào đơn . 6

2.2.4 Nuôi cấy protoplast – lai protoplast 7

2.2.5 Nuôi cấy hạt phấn 7

2.3 Quy trình nhân giống in vitro 7

2.3.1 Khử trùng mẫu cấy . 7

2.3.2 Tái sinh mẫu nuôi cấy 8

2.3.3 Nhân nhanh 8

2.3.4 Tạo cây hoàn chỉnh 8

2.3.5 Đưa cây ra đất 8

2.4 Những vấn đề còn tồn tại trong nhân giống cây trồng . 9

2.4.1 Tính bất định về mặt di truyền . 9

2.4.2 Sự hoại mẫu 9

2.4.3 Sử dụng thuốc kháng sinh 10

2.4.4 Việc sản xuất các chất gây độc từ mẫu cấy 10

2.4.5 Hiện tượng thủy tinh thể . 10

2.5 Ứng dụng kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào trong nông nghiệp 11

2.5.1 Vi nhân giống 11

2.5.2 Sản xuất và bảo quản cây sạch bệnh 12

2.5.3 Bảo quản và nhân giống in vitro . 12

2.6 Chất điều hòa sinh trưởng thực vật (ĐHSTTV) . 12

2.6.1 Auxin . 12

2.6.2 Cytokinin . 13

2.7 Sơ lược về lan hồ điệp . 13

2.7.1 Vị trí phân loại . 13

2.7.2 Nguồn gốc, xuất xứ 14

2.7.3 Mô tả hình thái . 14

2.7.4 Trồng trọt và chăm sóc 17

2.7.5 Nhân giống truyền thống . 20

2.8 Vi nhân giống Phalaenopsis . 21

2.8.1 Nhân giống vô tính sử dụng chồi đỉnh . 21

2.8.2 Tái sinh chồi từ phát hoa Phalaenopsis 22

2.8.3 Tái sinh PLB từ mô lá Phalaenopsis . 23

2.8.4 Tăng trưởng PLB thành cây con 23

2.9 Giá trị kinh tế của lan hồ điệp . 24

_Toc241549069Chương 3 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THÍ NGHIỆM .26

3.1 Thời gian và địa điểm 26

3.2 Phương tiện thí nghiệm . 26

3.2.1 Đối tượng thí nghiệm . 26

3.2.2 Trang thiết bị và dụng cụ 26

3.3 Tiến hành thí nghiệm . 28

3.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ nước javel đến độ sạch của mẫu

cấy 28

3.3.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của nồng độ BA,TDZ, điều kiện nuôi cấy tới quá trình tạo

protocorm từ lá cây hồ điệp 29

3.3.3 Thí nghiêm 3:Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ NAA đến sinh trưởng, phát triển

của cây lan hồ điệp in vitro . 30

3.4 Xử lý số liệu . 31

Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32

4.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của nồng độ nước javel đến độ sạch của mẫu cấy 32

4.2 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của nồng độ BAP,TDZ, điều kiện nuôi cấy tới quá trình tạo

protocorm từ lá cây hồ điệp in vitro . 35

4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng của nồng độ NAA đến sinh trưởng, phát triển của cây lan hồ

điệp in vitro 43

Chương 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 49

5.1 Kết luận 49

5.2 Đề nghị . 49

TÀI LIỆU THAM KHẢO .50