1. MỞ ĐẦU 1

1.1. Đặt vấn đề 1

1.2. Mục đích, nội dung nghiên cứu 3

1.2.1. Mục đích 3

1.2.2. Nội dung 3

2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4

2.1. Giới thiệu sơ lược về cây mía 4

2.1.1. Nguồn gốc và lịch sử phát triển 4

2.1.2. Phân loại học 4

2.1.3. Phân bố 5

2.1.4. Đặc điểm thực vật học 5

2.1.4.1. Các bộ phận của cây mía 5

2.1.4.2. Các giai đoạn sinh trưởng và phát triển 6

2.1.5. Giá trị kinh tế của cây mía 8

2.2. Các loại bệnh hại trên mía 9

2.3. Sơ lược về bệnh cằn mía gốc 12

2.3.1. Tác nhân gây bệnh 12

2.3.2. Triệu chứng 13

2.3.3. Sự phát triển, lan truyền dịch bệnh 14

2.3.4. Biện pháp ngăn chặn và kiểm soát dịch bệnh

2.4. Các phương pháp chẩn đoán, phát hiện vi khuẩn Lxx

2.4.1. Phương pháp chẩn đoán truyền thống 16

2.4.2. Phương pháp chẩn đoán trực tiếp bằng kính hiển vi 16

2.4.3. Phương pháp nhuộm STM 16

2.4.4. Phương pháp huyết thanh học 17

2.4.5. Phương pháp chẩn đoán dựa vào kỹ thuật sinh học phân tử 18

2.5. Tình hình nghiên cứu bệnh cằn mía gốc 19

2.5.1. Trên thế giới 19

2.5.2. Trong nước 20

3. VẬT LIỆU PHƢƠNG PHÁP 21

3.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu 21

3.2. Vật liệu và hóa chất thí nghiệm 21

3.2.1. Vật liệu thí nghiệm 21

3.2.2. Hóa chất thí nghiệm 21

3.2.3. Thiết bị, dụng cụ 22

3.3. Phương pháp nghiên cứu 22

3.3.1. Phương pháp thu thập mẫu 22

3.3.2. Phương pháp nhuộm STM 24

3.3.3. Phương pháp chủng bệnh lên cây nuôi cấy mô bằng dịch chiết của cây mía bị bệnh 24

3.3.4. Phương pháp tiến hành các thử nghiệm sinh hóa bước đầu khẳng định vi khuẩn Lxx từ các dòng vi khuẩn phân lập được

3.3.4.1. Xác định Gram của vi khuẩn 24

3.3.4.2. Thử nghiệm khả năng lên men carbohydrate 26

3.3.4.3. Thử nghiệm xác định hoạt động của enzyme ngoại bào ở vi sinh vật 26

3.4. Bố trí thí nghiệm 27

4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29

4.1. Thí nghiệm 1: Khảo sát tỉ lệ phân bố của vi khuẩn Lxx dọc theo lóng của cây mía bị bệnh 29

4.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát thời gian vi khuẩn Lxx gây tắc mạch và tỉ lệ cây bị bệnh sau khi chủng 34

4.3. Thí nghiệm 3: Nuôi cấy phân lập vi khuẩn Lxx 38

4.4. Thí nghiệm 4: Thử nghiệm sinh hóa bước đầu khẳng định vi khuẩn Lxx từ các dòng vi khuẩn phân lập được 41

5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 45

5.1. Kết luận 45

5.2. Đề nghị 45

6. TÀI LIỆU THAM KHẢO 47

Tài liệu tham khảo Tiếng Việt 47

Tài liệu tham khảo Tiếng Anh 48

Tài liệu tham khảo Internet 51

7. PHỤ LỤC 52

Phụ lục 1: Môi trường SC 52

Phụ lục 2: Môi trường MSC 52

Phụ lục 3: Môi trường lỏng S853

Phụ lục 4: Môi trường Phenol Red Carbohydrate Broth 53

Phụ lục 5: Môi trường Starch 53

Phụ Lục 6: Bảng sinh hóa phát hiện vi khuẩn Lxx 5