MỤC LỤC

1. PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1

1.1. Đặt vấn đề 1

1.2. Mục đích yêu cầu đề tài 2

1.2.1. Mục đích 2

1.2.2. Yêu cầu của đề tài 2

2. PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1. Sơ lược về cây hoa lan 3

2.1.1. Nguồn gốc, vị trí trong hệ thống phân loại thực vật 3

2.1.2. Đặc tính thực vật học của địa lan 4

2.1.3. Đặc điểm thực vật của địa lan Hồng hoàng Sapa 7

2.1.4. Yêu cầu về ngoại cảnh của cây lan 7

2.2. Tình hình sản xuất hoa lan trong và ngoài nước 11

2.2.1. Tình hình sản xuất hoa trên thế giới 11

2.2.2 Tình hình sản xuất hoa lan ở Việt Nam 12

2.3. Các nghiên cứu về nhân giống địa lan bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào 13

2.3.1. Cơ sở khoa học của biện pháp nhân giống vô tính bằng nuôi cấy mô tế bào 13

2.3.2. Một số nghiên cứu tiêu biểu 14

2.4. Phương pháp cắt lớp mỏng tế bào (Thin cell layers - TCL) 15

2.4.1. Khái niệm: 15

2.4.2. Một số nghiên cứu về phương pháp cắt lớp mỏng tế bào 15

2.5. Kĩ thuật cắt lớp mỏng tế bào (TCL) 16

2.5.1. Phương pháp TCL kinh điển 16

2.5.2. Phương pháp TCL cải tiến 16

2.6. Quy trình kỹ thuật về nuôi cấy mô tế bào 17

2.7. Các vấn đề cần quan tâm trong nhân giống in - vitro 18

2.7.1. Tính bất định về mặt di truyền (genetic in stability) 18

2.7.2. Sự nhiễm mẫu (explantcontamination) 19

2.7.3. Sự tiết độc tố từ mẫu cấy (Toxic compounds) 19

2.7.4. Hiện tượng thuỷ tinh hoá (vitri fication, hyperhy dricity) 20

2.8. Quy trình trồng và chăm sóc cây Địa lan nhân bằng nuôi cấy mô 20

2.8.1. Giai đoạn lấy từ trong ống nghiệm ra 21

2.8.2. Giai đoạn ở trong chậu chung 21

2.8.3. Giai đoạn trồng vào chậu nhỏ 22

2.8.4. Giai đoạn thay chậu nhỏ và trồng vào chậu lớn 23

2.9. Một số kỹ thuật trồng Địa lan cơ bản 23

2.9.1. Kĩ thuật trồng cây con vào chậu 23

2.9.2. Kỹ thuật chuyển chậu 24

2.9.3. Nước tưới cho lan 25

2.9.4. Kỹ thuật thúc mầm cây 25

2.9.5. Phòng trừ bệnh cho cây 26

3. PHẦN 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27

3.1. Vật liệu 27

3.2. Nội dung nghiên cứu 27

3.2.1. Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng của việc bổ sung khoai tây vào môi trường đến sự nảy mầm của hạt: 27

3.2.2. Thí nghiệm 2: Xác định môi trường khởi động thích hợp cho sự phát sinh hình thái của lát cắt 27

3.2.3. Thí nghiệm 3: Nghiên cứu ảnh hưởng của kinetin và BA tới quá trình nhân nhanh thể protocorm. 28

3.2.4. Thí nghiệm 4: Nghiên cứu ảnh hưởng của nước dừa( ND) đến hệ số nhân, chất lượng của chồi: 29

3.2.5. Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng của than hoạt tính và -NAA đối với sự ra rễ của cây. 29

3.2.6. Thí nghiệm 6: Nghiên cứu ảnh hưởng việc xử lý giá thể đối với cây ra vườn ươm 30

3.2.7. Thí nghiệm 7: Nghiên cứu ảnh hưởng chế độ che đối với cây ra vườn ươm. 30

3.2.8. Thí nghiệm 8: Nghiên cứu ảnh hưởng của dinh dưỡng đến sự sinh trưởng và phát triển của cây 30

3.3. Phương pháp nghiên cứu 30

3.3.1. Cách bố trí thí nghiệm 30

3.3.2. Phương pháp tiến hành 31

4. PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33

4.1. Tạo nguồn vật liệu vô trùng 34

4.2. Nghiên cứu nhân nhanh bằng phương pháp cát lát mỏng 35

4.3. Nghiên cứu ảnh hưởng nhóm Cytokinin đến quả trình nhân nhanh thể protocorm 39

4.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của nước dừa lên hệ số nhân và chất lượng của chồi 43

4.5. Giai đoạn tạo cây hoàn chỉnh 43

4.6. Các nghiên cứu ở giai đoạn sau nuôi cấy mô 43

4.6.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của biện pháp xử lý giá thể đến sự sinh trưởng phát triển của cây địa lan Hồng hoàng giai đoạn bồn mạ. 43

4.6.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của biện pháp che tối khi cây địa lan đưa ra vườn ươm 43

4.6.3. Ảnh hưởng của dinh dưỡng khác nhau đến sự sinh trưởng 43

5. PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43

5.1. Kết luận 43

5.2. Đề nghị 43

TÀI LIỆU THAM KHẢO 43