TÓM TẮT

Mục tiêu: Tiến hành điều chế asiaticosid có độ tinh khiết cao từ bột trích tinh

Rau má bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao.

Phương pháp: Sử dụng máy sắc ký lỏng hiệu năng cao phân tích để thăm dò điều kiện thích hợp, từ đó áp dụng qua máy sắc ký lỏng hiệu năng cao điều chế để thu được asiaticosid.(Error! Reference source not found.)

Kết quả: Thu được asiaticosid có độ tinh khiết cao có thể sử dụng làm chấtchuẩn với điều kiện sắc ký điều chế như sau: Cột Discovery HS C18 (250 x21,2mm; 10µm), với pha động là hỗn hợp gồm methanol – nước (60:40), tốc độ dòng 20ml/phút, đầu dò SPD đặt ở 203 nm. Cấu trúc hóa học và độ tinh khiết được xác định lại bằng phương pháp NMR.(Error! Reference source not found.)

Kết luận: Bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao, chúng ta có thể điều chế các chấtchuẩn có độ tinh khiết cao một cách nhanh chóng và hiệu quả.

Từ khóa: điều chế, sắc ký lỏng hiệu năng cao phân tích, asiaticosid.

ABSTRACT

PREPARATION OF ASIATICOSIDE REFERENCE STANDARD BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

Nguyen Thuy Hai, Nguyen Minh Duc

* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 14 - Supplement of No 1 - 2010: 59-63

Objective: Preparation of asiaticoside with high purity from a powder extract of Centella asiatica by preparative high performance liquid chromatography (HPLC) method.

Method: Using analytical HPLC to determine the appropriate separating conditions, we carried out the found conditions to the preparative HPLC to obtain asiaticoside.

Results: We obtained asiaticoside of high purity which can be used as standard with the preparative HPLC conditions as follows: Discovery HS C18 column (l:250 x i.d :21.2 mm; particle size: 10µm), mobile phase: MeOH – H2O (60: 40), flow rate 20ml/min, SPD- 20A detector set at 203 nm. Chemical structure and purity of asiaticoside were determined by conventional methods (analytical HPLC and NMR).

Conclusions: By preparative HPLC, we can produce asiaticoside with standard grade, the process was proven more quickly and efficient than classical methods.

Key words: preparation, analytical HPLC, asiaticoside.

ĐẶT VẤN ĐỀ

Một trong những điểm yếu lớn nhất hiện nay của việc khai thác sử dụng cây thuốc và các chế phẩm từ cây thuốc là vấn đề kiểm soát chất lượng. Điều này làm hạn chế khả năng khai thác sử dụng nguồn tài nguyên cây thuốc dồi dào của đất nước ta. Hiện nay nhiều phương pháp kiểm nghiệm hiện đại như các phương pháp phổ, sắc ký lỏng hiệu năng cao . . . rất hữu hiệu trong việc tiêu chuẩn hoá và kiểm định cây thuốc và thuốc từ dược liệu. Tuy nhiên, để áp dụng các phương pháp này, một trong những yêu cầu đầu tiên là phải có các chất chuẩn. Hơn thế nữa, các chất chuẩn còn rất cần thiết cho công tác nghiên cứu phát triển dược liệu và các chế phẩm từ dược liệu.

Tuy nhiên, một trong những khó khăn cho việc phân tích, kiểm nghiệm ở nước ta là thiếu các chất chuẩn cần thiết, vì các chất chuẩn mua từ nước ngoài rất đắt tiền, nhiều khi không có sẵn.

Xuất phát từ các lý do trên, đề tài này được thực hiện nhằm mục tiêu chiết xuất, điều chế asiaticosid để làm chất chuẩn phục vụ công tác kiểm định thuốc, tiêu chuẩn hóa chất lượng các sản phẩm và nguyên liệu chứa asiaticosid.

ĐỐI TƯỢNG - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Đối tượng

Bột trích tinh rau má do Công ty TNHH ADC cung cấp.

Dung môi, hóa chất

Methanol, HPLC, Merck, Đức.

Thiết bị

Máy HPLC phân tích LC-10 AD (Shimadzu, Japan). Máy HPLC điều chế LC- 20 A (Shimadzu, Japan). Máy cô chân không R-200, Buchi, Thụy Sỹ.

Phương pháp nghiên cứu

Thăm dò điều kiện trên HPLC phân tích

Chúng tôi tiến hành thăm dò điều kiện thích hợp để tách asiaticosid từ bột trích tinh rau má trên máy HPLC phân tích, từ đó áp dụng qua máy HPLC điều chế. Do nếu trực tiếp thăm dò trên máy HPLC điều chế sẽ rất lãng phí dung môi.