MỤC LỤC

Phần Trang

LỜI CẢM ƠN .iii

TÓM TẮT . iv

SUMMARY . v

MỤC LỤC . vi

DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT ix

DANH SÁCH CÁC HÌNH . ix

DANH SÁCH CÁC BẢNG xi

Chương 1. MỞ ĐẦU 1

1.1. Đăt vấn đề 1

1.2. Mục đích và yêu cầu 2

1.2.1. Mục đích 2

1.2.2. Yêu cầu 2

Chương 2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU . 3

2.1. Nhân giống cây trồng in vitro . 3

2.1.1. Khái niệm nuôi cấy mô tế bào thực vật . 3

2.1.2. Cơ sở khoa học chung về nuôi cấy mô tế bào thực vật . 3

2.1.3. Lợi ích của nhân giống bằng nuôi cấy mô tế bào thực vật 5

2.1.4. Các giai đoạn nhân giống in vitro 5

2.1.4.1. Giai đoạn 1: Khử trùng mô nuôi cấy . 5

2.1.4.2. Giai đoạn 2: Tái sinh mẫu nuôi cấy 6

2.1.4.3. Giai đoạn 3: Nhân nhanh 6

2.1.4.4. Giai đoạn 4: Tạo cây hoàn chỉnh 6

2.1.4.5. Giai đoạn 5: Đưa cây ra đất 7

2.1.5. Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình nuôi cấy mô . 7

2.1.5.1. Mô nuôi cấy 7

2.1.5.2. Vô trùng trong nuôi cấy 7

2.1.5.3. Điều kiện nuôi cấy 9

2.1.5.4. Môi trường nuôi cấy . 12

2.1.5.5. Vai trò của chất kích thích sinh trưởng trong nuôi cấy 12

2.1.5.6. Ảnh hưởng của pH và Agar 14

2.2. Giới thiệu về cây dầu mè (Jatropha curcas L.) 16

2.2.1. Vị trí phân loại . 16

2.2.2. Đặc điểm sinh học 17

2.2.2.1. Mô tả . 17

2.2.2.2. Sinh thái 18

2.2.3. Công dụng 19

2.2.3.1. Nhựa mủ . 19

2.2.3.2. Lá, vỏ và rễ cây . 19

2.2.3.3. Hạt và dầu . 19

2.2.3.4. Dầu mè và nguyên liệu sinh học . 20

2.2.4. Nhân giống . 22

2.2.4.1. Phương pháp nhân giống cổ truyền 22

2.2.4.2. Phương pháp nhân giống hiện đại 23

Chương 3. VẬT LIỆU VÀ PHưƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 25

3.1. Thời gian và địa điểm thí nghiệm . 25

3.2. Vật liệu 25

3.2.1. Đối tượng thí nghiệm . 25

3.2.2. Trang thiết bị và dụng cụ . 25

3.2.3. Môi trường nuôi cấy . 25

3.2.4. Điều kiện nuôi cấy in vitro . 27

3.3. Phương pháp nghiên cứu . 27

3.3.1. Phương pháp khử trùng mẫu 27

3.3.2. Bố trí thí nghiệm 28

3.3.2.1. Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của nồng độ chất khử trùng

và thời gian khử mẫu đến tỉ lệ sống của mẫu cây dầu mè 28

3.3.2.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát môi trường khoáng cơ bản

thích hợp để nuôi cấy mô cây dầu mè in vitro 29

3.3.2.3. Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng của BA đến khả năng tạo

chồi của cây dầu mè 30

3.3.2.4. Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng của BA và IBA đến khả năng

tạo chồi của cây dầu mè trong điều kiện in vitro 31

3.3.2.5. Thí nghiệm 5: Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè in vitro 32

3.3.3. Phương pháp xử lý số liệu . 33

Chương 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 34

4.1. Thí nghiệm 1: Vô trùng mô cấy ban đầu từ cây thực sinh 34

4.1.1. Vô trùng mẫu hạt . 35

4.1.2. Vô trùng mẫu chồi . 36

4.2. Thí nghiệm 2: Khảo sát môi trường khoáng cơ bản cho cây dầu mè

in vitro 39

4.3. Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng của BA đến sự hình thành chồi của

cây dầu mè 41

4.4. Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng của BA và IBA đến sự hình thành chồi

của cây dầu mè 43

4.5. Thí nghiệm 5: Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè in vitro . 45

Chương 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ . 47

5.1. Kết luận . 47

5.2. Đề nghị 47

Chương 6. TÀI LIỆU THAM KHẢO 48

PHẦN PHỤ LỤC a

DANH SÁCH CÁC HÌNH

Hình 2.1: Cây dầu mè (Jatropha curcas L.) . 16

Hình 2.2: Lá và hoa cây dầu mè 18

Hình 2.3: Hoa, quả và hạt cây dầu mè 18

Hình 2.4: Các cây sản xuất dầu thực vật . 22

Hình 4.2: Chồi cây dầu mè nảy từ các hạt vô trùng 38

Hình 4.1: Mẫu thực sinh cây dầu mè được vô trùng phát sinh chồi . 38

Hình 4.3: Sự phát triển của cây dầu mè trên các môi trường khoáng cơ bản . 40

Hình 4.4: Ảnh hưởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè 42

Hình 4.5: Ảnh hưởng của BA và IBA đến sự tạo chồi của cây dầu mè 44

Hình 4.6: Nuôi cấy tạo rễ cây dầu mè in vitro 44

Hình 4.7: Cây dầu mè in vitro . 46

DANH SÁCH CÁC BẢNG

Bảng 2.1: Năng suất dầu của cây dầu mè 20

Bảng 3.1: Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian xử lý vô trùng mẫu 29

Bảng 3.2: Thí nghiệm xác định môi trường khoáng cơ bản 30

Bảng 3.3: Ảnh hưởng của nồng độ BA đến khả năng tạo cụm chồi in vitro

cây dầu mè . 31

Bảng 3.4: Ảnh hưởng của BA và IBA đến sự tạo chồi của cây dầu mè . 32

Bảng 3.5: Ảnh hưởng của IBA đến tạo rễ cây dầu mè 33

Bảng 4.1: Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến

tỉ lệ mẫu hạt vô trùng . 35

Bảng 4.2: Ảnh hưởng của nồng độ NaOCl và thời gian khử mẫu đến

tỉ lệ mẫu chồi vô trùng . 36

Bảng 4.3: Khảo sát môi trường khoáng cơ bản cho cây dầu mè . 39

Bảng 4.4: Ảnh hưởng của BA đến sự tạo chồi của cây dầu mè 41

Bảng 4.5: Ảnh hưởng của BA và IBA đến sự tạo chồi của cây dầu mè . 43

Bảng 4.6: Tác động của IBA đến việc tạo rễ cây dầu mè in vitro . 45

Nuôi cấy mô cây dầu mè (Jatropha curcas L